《双飞上下铺姐妹花中谁和谁是一对》在群山环绕的小山村里，双胞胎姐妹何大燕、何小燕和身患重病的母亲相依为命。父亲去世后，家庭经济困难，为完成小学学业，姐妹俩一边照顾母亲，一边捡破烂。读完小学后，虽有家庭特困证明减轻学费压力，但因母亲需要照顾，姐妹俩面临只能一人上学的抉择，大燕将机会让给了小燕。开学后，小燕得知仍需校服费等费用，因无钱购买只能看着同学参加升旗。小燕学习努力，看到姐姐偷偷翻初中课本，便想出利用双胞胎身份轮流上学的主意，大燕同意。后来，姐妹俩轮流上学的事被同桌冯蔻蔻发现，冯蔻蔻被她们的事迹感动，没有声张。学校老校长也了解到姐妹俩的情况并提供帮助，她们有了校服，还获得特困生助学金。但后来大燕和冯蔻蔻捡报废交通指示牌卖钱，受到派出所追查，轮流上学的事被学校发现。最终，老校长决定让姐妹俩同时重返学校。两年后，在老校长的帮助下，母亲的病逐渐好转，姐妹俩也得以继续学业。